7. Оценка качества спермы
Для проверки качества спермы под микроскопом рекомендуется пользоваться увеличением от 120 до 300 раз. При наличии объектива с цифрой «20» используют окуляры с цифрами «7х», «10х» или «15х». При отсутствии объектива «20х» можно пользоваться объективом «8х» и окуляром «15х» (увеличение 120 раз). Начинают микроскопию с малого увеличения.
7.1. Определение подвижности спермиев.
Перед взятием пробы на исследование сперму вращательным движением перемешивают, стерильной стеклянной палочкой каплю разбавленной 2,9%-ным раствором цитрата натрия спермы наносят на предварительно подогретое до +38С предметное стекло, накрывают теплым покровным стеклом так, чтобы не образовалось воздушных пузырьков. Путем просмотра отыскивают поле зрения с наибольшей подвижностью спермиев.
Подвижность спермиев оценивают по 10-бальной шкале. Высшую оценку (10 баллов) получает сперма, в которой практически все спермии имеют прямолинейно-поступательное движение. При оценке 9 баллов таких спермиев 90%, 8 баллов - 80% и т. д. Другие виды движения спермиев (манежное, колебательное) являются патологией и их не следует учитывать.
При использовании спермы в соломинках каплю спермы выдавливают из шприца на подогретое до +38С предметное стекло, рядом помещают каплю теплого 2,9%-ного раствора цитрата натрия, смешивают с помощью стеклянной палочки, накрывают покровным стеклом и оценивают под микроскопом.
При использовании спермы в облицованных гранулах, оболочка которых выполнена из прозрачного полимерного материала, качество спермы оценивают перед осеменением животных без предварительной разгерметизации спермодозы. Для этого гранулу, предварительно протерев стерильной салфеткой, размещают на предметном стекле и прижимают ее вторым предметным стеклом с помощью специального зажима. Участок гранулы, расположенный между стеклами подводят под объектив микроскопа и оценивают сперму.
7.2. Определение выживаемости оттаянной спермы при температуре +38С.
Соломинки или облицованные гранулы со спермой с помощью охлажденного корнцанга, а необлицованные гранулы с помощью охлажденного анатомического пинцета вынимают из сосуда Дьюара. Соломинки или облицованные гранулы погружают в водяную баню при температуре воды + 38С на 10 сек., затем вынимают, протирают насухо стерильной салфеткой. Вскрывают ампулы с 2,9%-ным раствором цитрата натрия и мерной пипеткой переносят 0,5 мл цитрата в стерильные пенициллиновые флаконы, закрывают стерильными пробками и ставят в термостат при +38С. Ножницами обрезают оба конца у соломинки и один конец у облицованной гранулы, помещают сперму во флаконы. Необлицованные гранулы оттаивают в пеницил-линовом флаконе с 2,9%-ным цитратом натрия. Доводят объем содержимого флаконов до 1 мл раствором цитрата, закрывают пробками и помещают в термостат при +38С на 5 часов.
Сперма считается жизнеспособной, если по истечении этого времени в ней обнаруживают не менее 5% (0,5 балла) спермиев с прямолинейным поступательным движением.
В соответствии с ГОСТом 2630 - 83 (Изменения № 1) «Сперма быков замороженная» после ее оттаивания должна соответствовать следующим требованиям:
- подвижность спермиев, баллы (%) - не ниже 4 (40%)
- число спермиев с прямолинейным
поступательным движением (ППД) в дозе - не менее 15 млн.
- объем дозы, мл - 0,1 - 1,0
- выживаемость спермиев при + 38С - не менее 5 часов
- колититр - отрицательный
- патогенные микроорганизмы - не допускаются
От быков-производителей, проверенных по качеству потомства и признанных улучшателями, а также мясных пород, допускается к использованию сперма с подвижностью не ниже 3-х баллов (30%) и числом спермиев с прямолинейным поступательным движением в дозе не менее 10 млн.
8. Техника безопасности при искусственном осеменении коров и телок
8.1. Оператор по искусственному осеменению должен пройти инструктаж по технике безопасности на племпредприятии и иметь допуск к работе с сосудами Дьюара. При этом следует руководствоваться "Рекомендациями по технике безопасности и эксплуатации сельскохозяйственного криогенного оборудования" (М. 1984г.) и «Правилами по охране труда в животноводстве» (Орел, 1995), утвержден-ными Министерством сельского хозяйства РФ.
При эксплуатации сосудов Дьюара необходимо соблюдать следующие правила:
- при заправке сосуда жидким азотом следует надевать защитные очки и перчатки или рукавицы из натуральных материалов;
- одежда должна быть без карманов, брюки - без манжет и закрывать верх обуви, рукавицы должны быть сухими и свободно сниматься с руки;
- шланг опускают до дна сосуда и закрепляют в таком положении до окончания заправки (появления брызг над горловиной);
- не следует заглядывать в сосуд для определения уровня заполнения;
- проводить заправку необходимо вдвоем, при возможном появлении признаков удушья следует вывести пострадавшего на свежий воздух, а при необходимости провести искусственное дыхание;
- не разрешается заполнять жидким азотом случайные емкости;
- нельзя закрывать горловину сосуда герметически, так как это может привести к повышению давления паров во внутреннем сосуде и взрыву; использовать только крышку, входящую в комплект.
- не использовать сосуд при появлении вокруг горловины инея или "снеговой шубы";
- в случае попадания жидкого азота на кожу, его следует немедленно смыть водой и насухо вытереть кожу;
- во избежание несчастных случаев при пониженной концентрации кислорода следует оборудовать помещение вентиляцией;
8.2.При работе с животными следует вести себя спокойно и уверенно, предупреждать свое приближение к ним ровным голосом. При проведении осеменения не должно быть посторонних людей и шума.
Операторы, имеющие незначительные раны, ссадины и кожные заболевания могут быть допущены к работе только с разрешения медицинского работника и при условии выполнения ими необходимых защитных мер.
При работе не отвлекаться, следить за поведением животного. Цепи и перекладины станка для осеменения должны располагаться несколько выше скакательных суставов животного. Не проводить ректальные исследования через перегородки или решетки, чтобы не повредить руки.
9. Техника осеменения коров и телок
9.1. Осеменение коров и телок проводят тремя способами, при которых разбавленную сперму вводят в шейку матки. Это визоцер-викальный, маноцервикальный и ректоцервикальный способы. Телок из-за узости влагалища осеменяют визоцервикальным и ректоцервикальным способами. Перед выборкой животных в охоте оператор обязан уточнить предполагаемые сроки наступления эструса, промежуток времени после отела, количество осеменений, проведенных ранее и результаты гинекологической диспансеризации. Затем проводится ректальный контроль и массаж половых органов, в целях их стимуляции.
Осеменение проводят только при отсутствии нарушений воспроизводительных функций одним из вышеперечисленных способов.
Независимо от способа осеменения животных оператор должен выполнять следующие правила:
- осеменение коров и телок проводить на пункте в станках или в стойле с соблюдением санитарных правил;
- работать в спецодежде, на одно животное использовать одну перчатку;
- ногти на руках должны быть коротко пострижены и обработаны пилочкой;
- работать с животным спокойно, не создавая стрессовых ситуаций;
- проводить туалет наружных половых органов животного (об-мыть, обработать раствором фурацилина и тщательно протереть стерильной салфеткой или тампоном).
9.2. Маноцервикальный способ.
При осеменении маноцервикальным способом сперму вводят в шейку матки с помощью руки, защищенной полиэтиленовой перчаткой, введенной во влагалище.
Маноцервикальный способ осеменения позволяет использовать замороженную сперму в любой расфасовке: в соломинках, в облицованных и необлицованных гранулах.
При проведении осеменения маноцервикальным способом можно применять зоошприцы (для облицованных гранул), шприцы ШО-3 (для соломинок), длинные полистироловые пипетки либо короткие полиэтиленовые катетеры в сочетании со шприцами или ампулами (для необлицованных гранул).
При осеменении животных с помощью полиэтиленовой ампулы оператор предварительно протирают ампулу тампоном смоченным 70°-ным спиртом, стерильными ножницами срезает колпачок и соединяет ее со стерильным катетером, не вынимая последнего из упаковочного полиэтиленового пакета. После этого оттаянную сперму набирают в ампулу через катетер.
После туалета наружных половых органов коровы надевают перчатку, смачивают ее стерильным физраствором, осторожно вводят руку во влагалище коровы и пальцами делают легкий массаж шейки матки. Вызвав сокращение шейки матки, не вынимая кисти руки из влагалища, другой рукой подают подготовленную для осеменения ампулу со вставленным катетером. Для удобства в работе катетер располагают вдоль среднего пальца и прижимают большим. Не меняя положения ампулы, вводят кисть руки до шейки матки и вставляют под контролем указательного пальца катетер на глубину 1,5 - 2 см в канал шейки матки. Массируя шейку матки кончиками пальцев, подталкивают ампулу ладонью до тех пор, пока катетер полностью (на глубину 6 - 7 см) не войдет в канал шейки матки. После этого приподнимают ампулу вверх на 2 - 3 см (угол наклона 15 - 20) и выдавливают из нее сперму большим и указательным пальцами. Сдавливать ампулу следует сначала у донышка, а затем перемещать давление к шейке ампулы, чтобы полностью выдавить сперму.
Шейка матки при массаже периодически сокращается, поэтому сперму следует выдавливать из ампулы в момент расслабления шейки и всасывающего действия матки. Если шейка матки перестала сокращаться, следует осторожно подвигать катетером из стороны в сторону или вперед-назад. При возобновлении сокращений сперма выдавливается легко.
После введения спермы в канал шейки матки, не разжимая ампулы, надо осторожно вынуть катетер и помассировать шейку матки.
При использовании облицованных гранул осеменение животных проводят с помощью зоошприца. Облицованную гранулу с оттаянной спермой включают в канал зоошприца и досылают ее толкателем до упора. Перед введением прибора во влагалище, стерильной иглой прокалывают оболочку гранулы через отверстие верхнего торца зоошприца.
Осеменение коров с помощью зоошприца (облицованные гранулы), шприца ШО-3 (соломинки) или длинных полистироловых пипеток (необлицованные гранулы) проводят аналогичным путем с определенной модификацией.
9.3. Визоцервикальный способ.
При визоцервикальном способе осеменения животных с применением спермы замороженной в соломинках, в облицованных и необлицованных гранулах, используют шприцы ШО-3, зоошприцы, одноразовые полистироловые пипетки, в сочетании с влагалищным зеркалом.
Перед работой влагалищное зеркало стерилизуют кипячением, сухим жаром или фламбированием, перед использованием подогревают до +38…+40 С; осветитель тщательно протирают спиртовым тампоном.
После санитарной обработки наружных половых органов животного подготовленное влагалищное зеркало с осветителем, держа его ручками в сторону и предварительно раскрыв половые губы, вводят во влагалище до упора. Далее зеркало поворачивают ручками вниз и осторожно раскрывают его ветви. Отыскав отверстие канала шейки матки, вводят в канал прибор на глубину 4 - 6 см. Медленно нажимая на поршень шприца, вводят сперму. После этого извлекают прибор, а затем зеркало, предварительно осторожно повернув его ручками в сторону с не полностью сомкнутыми ветвями, чтобы не ущемить слизистую оболочку влагалища.
Телок осеменяют аналогично, но при этом используют влагалищное зеркало меньшего размера.
Влагалищное зеркало после осеменения каждой коровы (телки) обмывают водой, моют теплым 3%-ным раствором бикарбоната натрия, затем обеззараживают.
9.4. Ректоцервикальный способ.
Осеменение коров и телок ректоцервикальным способом можно проводить с использованием спермы замороженной в соломинках, в облицованных и необлицованных гранулах, с помощью прибора ШО-3, зоошприца и одноразовых полистироловых пипеток.
После выборки животных в охоте и их клинического обследования, оператор по искусственному осеменению проводит туалет наружных половых органов. Затем осуществляет подготовку инструментов для осеменения и оттаивает необходимое количество доз спермы (1-2). После этого оператор надевает полиэтиленовую перчатку, обильно увлажненную стерильным физраствором или другим жироподобным составом. Сложив пальцы конусом, вращательными движениями, вводит руку в прямую кишку животного.
Нажимая введенной в прямую кишку рукой на верхний свод преддверия влагалища, приоткрывает половые губы и, не касаясь их концом инструмента, вводит его под углом 20 на глубину 15 см, а затем продвигает инструмент горизонтально к шейке матки. После этого оператор фиксирует каудальную часть шейки матки.
Существует три способа фиксации шейки матки, в зависимости от ее величины и структуры:
1. Фиксация шейки матки кистью руки.
2. Фиксация шейки матки между указательным и средним пальцами.
3. Фиксация ладонью, прижав шейку матки к лонным костям, если двумя предыдущими способами зафиксировать шейку матки не удается.
Следует помнить, что шейку матки нельзя фиксировать в период напряжения стенки прямой кишки, так как возможно травмирование слизистой оболочки или прокол стенки влагалища.
Убедившись, что пипетка попала в отверстие канала шейки матки, осторожно фиксируют шейку матки и легкими змеевидными в горизонтальной и вертикальной плоскостях движениями надевают шейку на пипетку, чтобы не повредить слизистую оболочку поперечных складок. Инструмент вводят на всю длину шейки до выхода в тело матки, контролируя его положение указательным пальцем руки. Затем, подавая поршень вперед и оттягивая инструмент на себя, равномерно распределяют сперму по всему каналу шейки матки. После этого осторожно извлекают сначала инструмент, а затем руку из прямой кишки.
Нельзя при фиксации захватывать тело матки, так как влагалищная часть шейки матки при этом опускается вниз и конец пипетки трудно ввести в отверстие канала шейки матки.
После осеменения животных необходимо выдержать в станке 1-2 часа.
10. Организация искусственного осеменения на молочных фермах и крупных комплексах
Искусственное осеменение коров и телок необходимо проводить в местах их привычного содержания. При беспривязном содержании искусственное осеменение маток проводят на пунктах (в станках), при привязном содержании - в стойлах. Осеменение животных в стойлах следует проводить при соответствующем санитарном состоянии фермы, с применением ректоцервикального способа. На крупных фермах и комплексах, при отсутствии стационарного пункта в непосредственной близости от лаборатории, необходимо иметь на 100 голов коров и телок 2-3 фиксационных станка, оборудованных кормушками и поилками. Осеменение животных следует проводить в соответствии с требованиями настоящих "Методических указаний по искусственному осеменению коров и телок". Опись необходимого оборудования, инструментов и материалов прилагается.
Для проверки качества спермы под микроскопом рекомендуется пользоваться увеличением от 120 до 300 раз. При наличии объектива с цифрой «20» используют окуляры с цифрами «7х», «10х» или «15х». При отсутствии объектива «20х» можно пользоваться объективом «8х» и окуляром «15х» (увеличение 120 раз). Начинают микроскопию с малого увеличения.
7.1. Определение подвижности спермиев.
Перед взятием пробы на исследование сперму вращательным движением перемешивают, стерильной стеклянной палочкой каплю разбавленной 2,9%-ным раствором цитрата натрия спермы наносят на предварительно подогретое до +38С предметное стекло, накрывают теплым покровным стеклом так, чтобы не образовалось воздушных пузырьков. Путем просмотра отыскивают поле зрения с наибольшей подвижностью спермиев.
Подвижность спермиев оценивают по 10-бальной шкале. Высшую оценку (10 баллов) получает сперма, в которой практически все спермии имеют прямолинейно-поступательное движение. При оценке 9 баллов таких спермиев 90%, 8 баллов - 80% и т. д. Другие виды движения спермиев (манежное, колебательное) являются патологией и их не следует учитывать.
При использовании спермы в соломинках каплю спермы выдавливают из шприца на подогретое до +38С предметное стекло, рядом помещают каплю теплого 2,9%-ного раствора цитрата натрия, смешивают с помощью стеклянной палочки, накрывают покровным стеклом и оценивают под микроскопом.
При использовании спермы в облицованных гранулах, оболочка которых выполнена из прозрачного полимерного материала, качество спермы оценивают перед осеменением животных без предварительной разгерметизации спермодозы. Для этого гранулу, предварительно протерев стерильной салфеткой, размещают на предметном стекле и прижимают ее вторым предметным стеклом с помощью специального зажима. Участок гранулы, расположенный между стеклами подводят под объектив микроскопа и оценивают сперму.
7.2. Определение выживаемости оттаянной спермы при температуре +38С.
Соломинки или облицованные гранулы со спермой с помощью охлажденного корнцанга, а необлицованные гранулы с помощью охлажденного анатомического пинцета вынимают из сосуда Дьюара. Соломинки или облицованные гранулы погружают в водяную баню при температуре воды + 38С на 10 сек., затем вынимают, протирают насухо стерильной салфеткой. Вскрывают ампулы с 2,9%-ным раствором цитрата натрия и мерной пипеткой переносят 0,5 мл цитрата в стерильные пенициллиновые флаконы, закрывают стерильными пробками и ставят в термостат при +38С. Ножницами обрезают оба конца у соломинки и один конец у облицованной гранулы, помещают сперму во флаконы. Необлицованные гранулы оттаивают в пеницил-линовом флаконе с 2,9%-ным цитратом натрия. Доводят объем содержимого флаконов до 1 мл раствором цитрата, закрывают пробками и помещают в термостат при +38С на 5 часов.
Сперма считается жизнеспособной, если по истечении этого времени в ней обнаруживают не менее 5% (0,5 балла) спермиев с прямолинейным поступательным движением.
В соответствии с ГОСТом 2630 - 83 (Изменения № 1) «Сперма быков замороженная» после ее оттаивания должна соответствовать следующим требованиям:
- подвижность спермиев, баллы (%) - не ниже 4 (40%)
- число спермиев с прямолинейным
поступательным движением (ППД) в дозе - не менее 15 млн.
- объем дозы, мл - 0,1 - 1,0
- выживаемость спермиев при + 38С - не менее 5 часов
- колититр - отрицательный
- патогенные микроорганизмы - не допускаются
От быков-производителей, проверенных по качеству потомства и признанных улучшателями, а также мясных пород, допускается к использованию сперма с подвижностью не ниже 3-х баллов (30%) и числом спермиев с прямолинейным поступательным движением в дозе не менее 10 млн.
8. Техника безопасности при искусственном осеменении коров и телок
8.1. Оператор по искусственному осеменению должен пройти инструктаж по технике безопасности на племпредприятии и иметь допуск к работе с сосудами Дьюара. При этом следует руководствоваться "Рекомендациями по технике безопасности и эксплуатации сельскохозяйственного криогенного оборудования" (М. 1984г.) и «Правилами по охране труда в животноводстве» (Орел, 1995), утвержден-ными Министерством сельского хозяйства РФ.
При эксплуатации сосудов Дьюара необходимо соблюдать следующие правила:
- при заправке сосуда жидким азотом следует надевать защитные очки и перчатки или рукавицы из натуральных материалов;
- одежда должна быть без карманов, брюки - без манжет и закрывать верх обуви, рукавицы должны быть сухими и свободно сниматься с руки;
- шланг опускают до дна сосуда и закрепляют в таком положении до окончания заправки (появления брызг над горловиной);
- не следует заглядывать в сосуд для определения уровня заполнения;
- проводить заправку необходимо вдвоем, при возможном появлении признаков удушья следует вывести пострадавшего на свежий воздух, а при необходимости провести искусственное дыхание;
- не разрешается заполнять жидким азотом случайные емкости;
- нельзя закрывать горловину сосуда герметически, так как это может привести к повышению давления паров во внутреннем сосуде и взрыву; использовать только крышку, входящую в комплект.
- не использовать сосуд при появлении вокруг горловины инея или "снеговой шубы";
- в случае попадания жидкого азота на кожу, его следует немедленно смыть водой и насухо вытереть кожу;
- во избежание несчастных случаев при пониженной концентрации кислорода следует оборудовать помещение вентиляцией;
8.2.При работе с животными следует вести себя спокойно и уверенно, предупреждать свое приближение к ним ровным голосом. При проведении осеменения не должно быть посторонних людей и шума.
Операторы, имеющие незначительные раны, ссадины и кожные заболевания могут быть допущены к работе только с разрешения медицинского работника и при условии выполнения ими необходимых защитных мер.
При работе не отвлекаться, следить за поведением животного. Цепи и перекладины станка для осеменения должны располагаться несколько выше скакательных суставов животного. Не проводить ректальные исследования через перегородки или решетки, чтобы не повредить руки.
9. Техника осеменения коров и телок
9.1. Осеменение коров и телок проводят тремя способами, при которых разбавленную сперму вводят в шейку матки. Это визоцер-викальный, маноцервикальный и ректоцервикальный способы. Телок из-за узости влагалища осеменяют визоцервикальным и ректоцервикальным способами. Перед выборкой животных в охоте оператор обязан уточнить предполагаемые сроки наступления эструса, промежуток времени после отела, количество осеменений, проведенных ранее и результаты гинекологической диспансеризации. Затем проводится ректальный контроль и массаж половых органов, в целях их стимуляции.
Осеменение проводят только при отсутствии нарушений воспроизводительных функций одним из вышеперечисленных способов.
Независимо от способа осеменения животных оператор должен выполнять следующие правила:
- осеменение коров и телок проводить на пункте в станках или в стойле с соблюдением санитарных правил;
- работать в спецодежде, на одно животное использовать одну перчатку;
- ногти на руках должны быть коротко пострижены и обработаны пилочкой;
- работать с животным спокойно, не создавая стрессовых ситуаций;
- проводить туалет наружных половых органов животного (об-мыть, обработать раствором фурацилина и тщательно протереть стерильной салфеткой или тампоном).
9.2. Маноцервикальный способ.
При осеменении маноцервикальным способом сперму вводят в шейку матки с помощью руки, защищенной полиэтиленовой перчаткой, введенной во влагалище.
Маноцервикальный способ осеменения позволяет использовать замороженную сперму в любой расфасовке: в соломинках, в облицованных и необлицованных гранулах.
При проведении осеменения маноцервикальным способом можно применять зоошприцы (для облицованных гранул), шприцы ШО-3 (для соломинок), длинные полистироловые пипетки либо короткие полиэтиленовые катетеры в сочетании со шприцами или ампулами (для необлицованных гранул).
При осеменении животных с помощью полиэтиленовой ампулы оператор предварительно протирают ампулу тампоном смоченным 70°-ным спиртом, стерильными ножницами срезает колпачок и соединяет ее со стерильным катетером, не вынимая последнего из упаковочного полиэтиленового пакета. После этого оттаянную сперму набирают в ампулу через катетер.
После туалета наружных половых органов коровы надевают перчатку, смачивают ее стерильным физраствором, осторожно вводят руку во влагалище коровы и пальцами делают легкий массаж шейки матки. Вызвав сокращение шейки матки, не вынимая кисти руки из влагалища, другой рукой подают подготовленную для осеменения ампулу со вставленным катетером. Для удобства в работе катетер располагают вдоль среднего пальца и прижимают большим. Не меняя положения ампулы, вводят кисть руки до шейки матки и вставляют под контролем указательного пальца катетер на глубину 1,5 - 2 см в канал шейки матки. Массируя шейку матки кончиками пальцев, подталкивают ампулу ладонью до тех пор, пока катетер полностью (на глубину 6 - 7 см) не войдет в канал шейки матки. После этого приподнимают ампулу вверх на 2 - 3 см (угол наклона 15 - 20) и выдавливают из нее сперму большим и указательным пальцами. Сдавливать ампулу следует сначала у донышка, а затем перемещать давление к шейке ампулы, чтобы полностью выдавить сперму.
Шейка матки при массаже периодически сокращается, поэтому сперму следует выдавливать из ампулы в момент расслабления шейки и всасывающего действия матки. Если шейка матки перестала сокращаться, следует осторожно подвигать катетером из стороны в сторону или вперед-назад. При возобновлении сокращений сперма выдавливается легко.
После введения спермы в канал шейки матки, не разжимая ампулы, надо осторожно вынуть катетер и помассировать шейку матки.
При использовании облицованных гранул осеменение животных проводят с помощью зоошприца. Облицованную гранулу с оттаянной спермой включают в канал зоошприца и досылают ее толкателем до упора. Перед введением прибора во влагалище, стерильной иглой прокалывают оболочку гранулы через отверстие верхнего торца зоошприца.
Осеменение коров с помощью зоошприца (облицованные гранулы), шприца ШО-3 (соломинки) или длинных полистироловых пипеток (необлицованные гранулы) проводят аналогичным путем с определенной модификацией.
9.3. Визоцервикальный способ.
При визоцервикальном способе осеменения животных с применением спермы замороженной в соломинках, в облицованных и необлицованных гранулах, используют шприцы ШО-3, зоошприцы, одноразовые полистироловые пипетки, в сочетании с влагалищным зеркалом.
Перед работой влагалищное зеркало стерилизуют кипячением, сухим жаром или фламбированием, перед использованием подогревают до +38…+40 С; осветитель тщательно протирают спиртовым тампоном.
После санитарной обработки наружных половых органов животного подготовленное влагалищное зеркало с осветителем, держа его ручками в сторону и предварительно раскрыв половые губы, вводят во влагалище до упора. Далее зеркало поворачивают ручками вниз и осторожно раскрывают его ветви. Отыскав отверстие канала шейки матки, вводят в канал прибор на глубину 4 - 6 см. Медленно нажимая на поршень шприца, вводят сперму. После этого извлекают прибор, а затем зеркало, предварительно осторожно повернув его ручками в сторону с не полностью сомкнутыми ветвями, чтобы не ущемить слизистую оболочку влагалища.
Телок осеменяют аналогично, но при этом используют влагалищное зеркало меньшего размера.
Влагалищное зеркало после осеменения каждой коровы (телки) обмывают водой, моют теплым 3%-ным раствором бикарбоната натрия, затем обеззараживают.
9.4. Ректоцервикальный способ.
Осеменение коров и телок ректоцервикальным способом можно проводить с использованием спермы замороженной в соломинках, в облицованных и необлицованных гранулах, с помощью прибора ШО-3, зоошприца и одноразовых полистироловых пипеток.
После выборки животных в охоте и их клинического обследования, оператор по искусственному осеменению проводит туалет наружных половых органов. Затем осуществляет подготовку инструментов для осеменения и оттаивает необходимое количество доз спермы (1-2). После этого оператор надевает полиэтиленовую перчатку, обильно увлажненную стерильным физраствором или другим жироподобным составом. Сложив пальцы конусом, вращательными движениями, вводит руку в прямую кишку животного.
Нажимая введенной в прямую кишку рукой на верхний свод преддверия влагалища, приоткрывает половые губы и, не касаясь их концом инструмента, вводит его под углом 20 на глубину 15 см, а затем продвигает инструмент горизонтально к шейке матки. После этого оператор фиксирует каудальную часть шейки матки.
Существует три способа фиксации шейки матки, в зависимости от ее величины и структуры:
1. Фиксация шейки матки кистью руки.
2. Фиксация шейки матки между указательным и средним пальцами.
3. Фиксация ладонью, прижав шейку матки к лонным костям, если двумя предыдущими способами зафиксировать шейку матки не удается.
Следует помнить, что шейку матки нельзя фиксировать в период напряжения стенки прямой кишки, так как возможно травмирование слизистой оболочки или прокол стенки влагалища.
Убедившись, что пипетка попала в отверстие канала шейки матки, осторожно фиксируют шейку матки и легкими змеевидными в горизонтальной и вертикальной плоскостях движениями надевают шейку на пипетку, чтобы не повредить слизистую оболочку поперечных складок. Инструмент вводят на всю длину шейки до выхода в тело матки, контролируя его положение указательным пальцем руки. Затем, подавая поршень вперед и оттягивая инструмент на себя, равномерно распределяют сперму по всему каналу шейки матки. После этого осторожно извлекают сначала инструмент, а затем руку из прямой кишки.
Нельзя при фиксации захватывать тело матки, так как влагалищная часть шейки матки при этом опускается вниз и конец пипетки трудно ввести в отверстие канала шейки матки.
После осеменения животных необходимо выдержать в станке 1-2 часа.
10. Организация искусственного осеменения на молочных фермах и крупных комплексах
Искусственное осеменение коров и телок необходимо проводить в местах их привычного содержания. При беспривязном содержании искусственное осеменение маток проводят на пунктах (в станках), при привязном содержании - в стойлах. Осеменение животных в стойлах следует проводить при соответствующем санитарном состоянии фермы, с применением ректоцервикального способа. На крупных фермах и комплексах, при отсутствии стационарного пункта в непосредственной близости от лаборатории, необходимо иметь на 100 голов коров и телок 2-3 фиксационных станка, оборудованных кормушками и поилками. Осеменение животных следует проводить в соответствии с требованиями настоящих "Методических указаний по искусственному осеменению коров и телок". Опись необходимого оборудования, инструментов и материалов прилагается.
11. Организация искусственного осеменения в мясном ското-водстве
Искусственное осеменение коров и телок мясных пород проводится с учетом перечисленных выше требований, а также особенностей технологии мясного скотоводства. Осеменение животных проводят сезонно, в большинстве хозяйствах в весенне-летний период (апрель-июнь) и в сжатые сроки (2-3 мес.).
Фермы и гурты, как правило, располагаются далеко друг от друга. В этих условиях, при большой нагрузке поголовья на скотника, а также вследствие сезонности осеменения, важно своевременно доставить на пункт сперму закрепленных быков, обеспечить выборку коров и телок в охоте и своевременно их осеменить. Для этого в зимний период на каждой ферме оборудуют пункт (лабораторию) искусственного осеменения. Осеменение проводят в фиксационных станках. В летний период на отгонных пастбищах необходимо иметь передвижной пункт (лабораторию), систему загонов, расколов и фиксационных станков. Для осеменения утром и вечером, по установленному распорядку дня, скотники выбирают коров и телок в охоте по номерам. По системе расколов животных в охоте прогоняют к пункту и фиксируют в станках, где и проводят их осеменение. После повторного осеменения и выдержки (1-2 часа) выгоняют в стадо. При наличии транспорта искусственное осеменение коров и телок можно проводить по кольцу.
12. Организация искусственного осеменения коров и телок, находящихся в собственности граждан (крестьянских (фермерских) хозяйств))
При обслуживании поголовья данной категории пункт должен располагаться отдельно от общественного поголовья скота.
В случае отсутствия пункта, работу по искусственному осеменению коров и телок можно проводить непосредственно на месте содержания животных. Осеменение животных следует осуществлять в соответствии с требованиями настоящих «Методических указаний по искусственному осеменению коров и телок». При этом необходимо придерживаться следующих правил:
- перед началом и окончанием работы следует руки мыть мылом и обрабатывать 70-ным этиловым спиртом;
- иметь отдельную спецодежду (халат, сапоги);
- иметь отдельный переносной сосуд Дьюара, перчатки и приборы; - одноразовые перчатки и пипетки после использования следует утилизировать.
В случае обнаружения того или иного заболевания у животного необходимо тщательно вымыть и обработать дезосредством сапоги, халат прокипятить. О случаях заболеваний сообщить ветеринарной службе. При наличии транспорта возможен вариант обслуживания поголовья, находящегося в собственности граждан (крестьянских (фермерских) хозяйств) по кольцевой системе.
13. Учет и отчетность на пункте искусственного осеменения
Поступление спермы со станции или племпредприятия на ферму должно оформляться соответствующим ордером на отправку-приемку спермы быка (приложение 2).
Оператор по искусственному осеменению ведет учет осеменений и отелов в журнале (приложение 3). Для рациональной организации учета работы со стадом и своевременного контроля за ходом искусственного осеменения животных Росплемобъединение и ВНИИ племенного дела рекомендуют использовать рабочий дневник оператора по искусственному осеменению крупного рогатого скота, куда он записывает коров и телок сразу же после осеменения, а затем записи переносит в журнал.
Если в хозяйстве используется персональный компьютер для ведения зоотехнического и племенного учета, то любая используемая в молочном скотоводстве программа имеет модуль "Воспроизводство". Технология работы по ней подробно описывается в инструкции к программе.
Автоматизированное рабочее место (АРМ) зоотехника-селекционера "Селэкс-Россия" имеет модуль, названный "Журнал осеменений". После вызова этого документа оператор компьютера видит список всех событий, которые можно ввести из журнала. Указав код желаемого события (осеменение, запуск, отел и т.д.), оператор попадает в соответствующий экран события и вносит данные.
В программе РАМЖ "Помощник зоотехника" автоматическое заполнение карточки племенной коровы 2-МОЛ и компьютерное ведение журнала осеменений осуществляется при работе с программным модулем "Оперативная обработка". При тщательном (без пропусков) внесении данных в конце отчетного месяца формируется бланк "План осеменения" по группам на следующий месяц и отдается оператору по искусственному осеменению, который в течение текущего месяца заполняет бланк "План осеменения" фактическими данными на каждую корову (телку). В конце месяца с заполненного бланка "План осеменения" данные вводятся в компьютер и цикл повторяется. Аналогичный подход применен и в программном комплексе "Эстафета" НП "Мосплем".
Регулярное внесение информации по воспроизводству стада (т.е. отдельных событий) позволяет получать оперативные и годовые таблицы в разрезе ферм (подразделений), операторов по искусствен-ному осеменению, быков-производителей и т.д., выдавать списки-прогнозы на осеменение, отелы, ректальные исследования, создавать аналитические таблицы по стаду.
Искусственное осеменение коров и телок мясных пород проводится с учетом перечисленных выше требований, а также особенностей технологии мясного скотоводства. Осеменение животных проводят сезонно, в большинстве хозяйствах в весенне-летний период (апрель-июнь) и в сжатые сроки (2-3 мес.).
Фермы и гурты, как правило, располагаются далеко друг от друга. В этих условиях, при большой нагрузке поголовья на скотника, а также вследствие сезонности осеменения, важно своевременно доставить на пункт сперму закрепленных быков, обеспечить выборку коров и телок в охоте и своевременно их осеменить. Для этого в зимний период на каждой ферме оборудуют пункт (лабораторию) искусственного осеменения. Осеменение проводят в фиксационных станках. В летний период на отгонных пастбищах необходимо иметь передвижной пункт (лабораторию), систему загонов, расколов и фиксационных станков. Для осеменения утром и вечером, по установленному распорядку дня, скотники выбирают коров и телок в охоте по номерам. По системе расколов животных в охоте прогоняют к пункту и фиксируют в станках, где и проводят их осеменение. После повторного осеменения и выдержки (1-2 часа) выгоняют в стадо. При наличии транспорта искусственное осеменение коров и телок можно проводить по кольцу.
12. Организация искусственного осеменения коров и телок, находящихся в собственности граждан (крестьянских (фермерских) хозяйств))
При обслуживании поголовья данной категории пункт должен располагаться отдельно от общественного поголовья скота.
В случае отсутствия пункта, работу по искусственному осеменению коров и телок можно проводить непосредственно на месте содержания животных. Осеменение животных следует осуществлять в соответствии с требованиями настоящих «Методических указаний по искусственному осеменению коров и телок». При этом необходимо придерживаться следующих правил:
- перед началом и окончанием работы следует руки мыть мылом и обрабатывать 70-ным этиловым спиртом;
- иметь отдельную спецодежду (халат, сапоги);
- иметь отдельный переносной сосуд Дьюара, перчатки и приборы; - одноразовые перчатки и пипетки после использования следует утилизировать.
В случае обнаружения того или иного заболевания у животного необходимо тщательно вымыть и обработать дезосредством сапоги, халат прокипятить. О случаях заболеваний сообщить ветеринарной службе. При наличии транспорта возможен вариант обслуживания поголовья, находящегося в собственности граждан (крестьянских (фермерских) хозяйств) по кольцевой системе.
13. Учет и отчетность на пункте искусственного осеменения
Поступление спермы со станции или племпредприятия на ферму должно оформляться соответствующим ордером на отправку-приемку спермы быка (приложение 2).
Оператор по искусственному осеменению ведет учет осеменений и отелов в журнале (приложение 3). Для рациональной организации учета работы со стадом и своевременного контроля за ходом искусственного осеменения животных Росплемобъединение и ВНИИ племенного дела рекомендуют использовать рабочий дневник оператора по искусственному осеменению крупного рогатого скота, куда он записывает коров и телок сразу же после осеменения, а затем записи переносит в журнал.
Если в хозяйстве используется персональный компьютер для ведения зоотехнического и племенного учета, то любая используемая в молочном скотоводстве программа имеет модуль "Воспроизводство". Технология работы по ней подробно описывается в инструкции к программе.
Автоматизированное рабочее место (АРМ) зоотехника-селекционера "Селэкс-Россия" имеет модуль, названный "Журнал осеменений". После вызова этого документа оператор компьютера видит список всех событий, которые можно ввести из журнала. Указав код желаемого события (осеменение, запуск, отел и т.д.), оператор попадает в соответствующий экран события и вносит данные.
В программе РАМЖ "Помощник зоотехника" автоматическое заполнение карточки племенной коровы 2-МОЛ и компьютерное ведение журнала осеменений осуществляется при работе с программным модулем "Оперативная обработка". При тщательном (без пропусков) внесении данных в конце отчетного месяца формируется бланк "План осеменения" по группам на следующий месяц и отдается оператору по искусственному осеменению, который в течение текущего месяца заполняет бланк "План осеменения" фактическими данными на каждую корову (телку). В конце месяца с заполненного бланка "План осеменения" данные вводятся в компьютер и цикл повторяется. Аналогичный подход применен и в программном комплексе "Эстафета" НП "Мосплем".
Регулярное внесение информации по воспроизводству стада (т.е. отдельных событий) позволяет получать оперативные и годовые таблицы в разрезе ферм (подразделений), операторов по искусствен-ному осеменению, быков-производителей и т.д., выдавать списки-прогнозы на осеменение, отелы, ректальные исследования, создавать аналитические таблицы по стаду.
ПРИЛОЖЕНИЯ
Приложение № 1
Утверждено___________________________
_______________________________________
Племенной службой региона
"________"________________20_____г.
ПАСПОРТ
пункта искусственного осеменения коров и телок
Ферма, бригада (отделение) №________________________________________________
хозяйства__________________________________________________________________
района ____________________________________________________________________
области (края, республики)___________________________________________________
Дата открытия пункта
"_______"___________________20______г.
Председатель комиссии
____________________________________
Главный ветврач района
____________________________________
Пункт искусственного осеменения___________________________________________
_________________________________________________________________________
(вид скота)
Оператор по искусственному осеменению______________________________________
(фамилия, имя, отчество)
__________________________________________________________________________
рождения 19_____г., имеет общеобразовательную подготовку_____________________
прошел специальную подготовку по искусственному осеменению при______________
__________________________________________________________________________
в _______г. срок обучения__________________________________________ дней.
Состояние, размеры лаборатории ______________________________________________
___________________________________________________________________________
Состояние, размеры моечной__________________________________________________
Состояние, размеры манежа __________________________________________________
Состояние, размеры тамбура и кладовой________________________________________
Наличие станка для фиксации коров и телок ____________________________________
Наличие помещений для передержки животных после осеменения__________________
___________________________________________________________________________
Система отопления на пункте__________________________________________________
Электроэнергия _____________________________________________________________
Водоснабжение _____________________________________________________________
Наличие нагревательных приборов (электроплита, газовые установки и т.д.)__________
___________________________________________________________________________
Наличие транспорта__________________________________________________________
Оборудование и материалы для пункта
искусственного осеменения коров и телок
________________________________________________________________
Оборудование и материалы Требуется Имеется Состояние
по норме в наличии годности
_______________1_____________________________2____________3_____________4_________
Микроскоп, шт. 1
Нагревательный столик или термостат
для микроскопа, шт. 1
Термос для хранения и перевозки спермы, шт. 2
Зеркало влагалищное, шт.:
для коров 2
для телок 2
Осветитель к зеркалу, шт. 2
Шприц-катетер, шт. 10
Стерилизатор для инструментов, шт. 1
Электро- или газовая плитка, шт. 1
Ножницы прямые и изогнутые, шт. 2
Корнцанг, шт. 1
Пинцет анатомический 25-30 см, шт. 1
Шприц металлический для осеменения, шт. 3
Подставка для инструментов, шт. 2
Штатив металлический, шт. 1
Термометр, шт.: комнатный 3
специальный 3
Мензурка или цилиндр измерительный
на 0,1-1 л, шт. 2
Воронки, шт. 2
Стекла предметные, шт. 50
Стекла покровные, шт. 200
Склянки на 1 и 5 л, шт. 2
Баночки с притертой пробкой, шт. 8
Тампонница, шт. 3
Чашка толстостенная, шт. 3
Колба коническая (на 1-1,5 л), шт. 2
Чашки бактериологические, шт. 10
Палочки стеклянные или пипетки
пастеровские, шт. 10
Спринцовка, шт. 2
Шкаф стеклянный для инструментов, шт. 1
Стол, шт. 2
Табурет, шт. 2
Сушильный шкаф, шт. 2
Умывальник, шт. 2
Кружка Эсмарха, шт. 1
Таз эмалированный, шт. 2
Утюг электрический, шт. 1
Ведро эмалированное, шт. 2
Весы с разновесами, шт. 1
Щетка для мытья рук, шт. 2
Дистиллятор, шт. 1
__________________________________________________________________________________
_______________1_____________________________2____________3_____________4_________
Спиртомер, шт. 1
Сосуд Дьюара, шт.:
стационарный 1
переносной 1
Рукавицы, пар 2
Очки 1
Х\б костюм (халат), шт. 2
Колпак (косынка), шт. 2
Фартук, шт. 2
Телогрейка, шт. 1
Сапоги (ботинки), пар 2
Полотенца, шт. 4
Акушерские перчатки, шт. 1
Раствор хлорамина 0,3%-ный, мл 500
Спирт-ректификат (на 100 коров), мл 500
Натрия бикарбонат, кг 2,5
Натрия цитрат, кг 0,3
Натрия хлорид, кг 0,2
Вата, кг: гигроскопическая 1,5
серая 5,0
Марля белая, мл 10
Сода кальцинированная, кг 2,0
Мыло хозяйственное, кг 2,0
Клеенка или полиэтиленовая пленка, м 5
Пенал, шт. 1
Комплект инструментов для мано- В зависимости от поголовья
цервикального способа
Комплект инструментов для ректо- В зависимости от поголовья
цервикального способа
Журнал искусственного осеменения
коров и телок, шт. 4
Методические указания по
искусственному осеменению
коров и телок, шт. 1
Состояние зоотехнического учета______________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
Ветеринарно-санитарное состояние хозяйства_____________________________________
_____________________________________________________________________________
Норма расхода спирта-ректификата: 5 г на двукратное осеменение одного животного
Заключение комиссии о готовности пункта
Полное название по искусственному осеменению с.-х. животных______________________
______________________________________________________________________________
Приложение 2
Ордер № ______________(форма 3-и.о.)
на отправку-приемку спермы быка
«______»______________20___г.
Производитель № ___________кличка_______________порода __________________________
Дата взятия _______________________________________________________________
Оценка разбавленной спермы кратковременного хранения перед отправкой _______________
__________баллов.
Концетрация сперматозоидов в 1 мл спермы (разбавленной) _________________________ млн.
Оценка замороженной спермы перед отправкой __________________________________баллов.
Концентрация сперматозоидов в 1 дозе спермы (замороженной) ______________________ млн.
Заявлено спермы ______________мл, в расфасовке _______________________________гранул,
________________________в соломинках.
Сдал: представитель станции _____________________________________________________
(фамилия, имя, отчество)
Принял: представитель хозяйства ___________________________________________________
(фамилия, имя, отчество, должность)
Хозяйство _______________________________________________________________________
Пункт ___________________________________________________________________________
Оборотная сторона ордера (формы 3-и.о.)
(нарастающим итогом)
Всего использовано спермы____________________________________________
мл, доз
Искусственно осеменено маток_________________________________________
голов
В том числе коров_________голов и первично осеменено маток_____________
Число осеменений____________________________________________________
Всего стельных маток_________________________________________________
голов
Абортировано и растелилось мертвым приплодом телят____________________
маток
Всего получено приплода от коров______________________________________
голов
нетелей_____________________________________________________________
голов
Оператор искусственного осеменения___________________________________
(фамилия, имя, отчество)
Дата "_______"_____________________20____г.
СОДЕРЖАНИЕ
Введение ……………………………………………………………………….
1. Организация пункта искусственного осеменения коров и телок
Стр
3
в хозяйстве ……………………………………………………………………..
3
2. Порядок открытия пункта искусственного осеменения коров
и телок ………………………………………………………………………….
4
3. Права и обязанности оператора по искусственному осеменению
коров и телок …………………………………………………………………..
5
4. Выбор времени осеменения коров и телок ………………………………….
6
5. Ветеринарно-санитарные правила на пунктах искусственного
осеменения коров и телок …………………………………………………….
8
6. Хранение и оттаивание замороженной спермы …………………………….
11
7. Оценка качества спермы ……………………………………………………...
16
8. Техника безопасности при искусственном осеменении коров и телок …..
18
9. Техника осеменения коров и телок ………………………………………….
19
10. Организация искусственного осеменения на молочных фермах
и крупных комплексах ………………………………………………………..
22
11. Организация искусственного осеменения в мясном скотоводстве ………
23
12. Организация искусственного осеменения коров и телок,
находящихся в собственности граждан (крестьянских (фермерских)
хозяйств ……………………………………………………………………….
23
13. Учет и отчетность на пункте искусственного осеменения ……………….
24
Приложения ………………………………………………………………….
26